Monkeypox Virus Real Time PCR Kit

Lyhyt kuvaus:

Kissa.Ei	B001P-01	Koko	48 testiä/sarja
Näyte	Seerumi/leesion erite	Trans.& Sto.Temp.	-25-15 ℃
Muoto	Esiseos lyofilisoitiin ja jaettiin 8 liuskaiseen PCR-putkeen
Sovellettava instrumentti	Reaaliaikainen PCR-laite, kuten ABI7500, Bio-Rad CFX96, SLAN-96S, QuantStudio ja BTK-8

Lähetä meille sähköpostia

Tuotetiedot

Tuotetunnisteet

Tuotteen yksityiskohdat

Käyttötarkoitus

Sitä käytetään Monkeypox-viruksen havaitsemiseen ihmisen seerumi- tai leesion eritenäytteistä käyttämällä reaaliaikaisia PCR-järjestelmiä.

Testin periaate

Tämä tuote on fluoresoivaan koettimeen perustuva Taqman® reaaliaikainen PCR-määritysjärjestelmä.Spesifiset alukkeet ja koettimet on suunniteltu Monkeypox-viruksen F3L-geenin havaitsemiseen.Ihmisen konservoituneeseen geeniin kohdistuva sisäinen valvonta valvoo näytteenottoa, näytteen käsittelyä ja reaaliaikaista PCR-prosessia väärien negatiivisten tulosten välttämiseksi.Pakkaus on täysin esisekoitettu lyofilisoitu järjestelmä, joka sisältää apinapoxviruksen havaitsemiseen tarvittavat materiaalit: nukleiinihapon monistusentsyymin, UDG-entsyymin, reaktiopuskurin, spesifisen alukkeen ja koettimen.

Pääsisältö

Toimitetut komponentit on lueteltu taulukossa.

Komponentit	Paketti	Ainesosa
Monkeypox virusLyofilisoitu esiseos	8 nauhaa PCR-putkea× 6 pussia	Alukkeet, koettimet, dNTP/dUTP-sekoitus, Mg2+, Taq DNA-polymeraasi, UDG-entsyymi
MPV positiivinen kontrolli	400 µl × 1 putki	Kohdegeenin sisältävät DNA-sekvenssit
MPV negatiivinen kontrolli	400 µl × 1 putki	DNA-sekvenssit, jotka sisältävät ihmisen geenisegmentin
Liuottava liuos	1 ml × 1 putki	Stabilisaattori
Vaatimustenmukaisuustodistus	1 kpl	/

Operaatio Flow

1. NäyteKokoelma:Näyte tulee kerätä steriileihin putkiin tämän mukaisesti

vakio teknisillä tiedoilla.

2. Reagenssin valmistelu (reagenssin valmistusalue)

Ota sarjan osat ulos ja tasapainota ne huoneenlämmössä valmiustilakäyttöä varten.

3. Näytteen käsittely (näytteen käsittelyalue)

3.1 Nukleiinihapon uuttaminen

On suositeltavaa ottaa 200 μL nestemäisiä näytteitä, positiivista kontrollia ja negatiivista kontrollia nukleiinihappojen uuttamista varten virus-DNA-uuttopakkausten vastaavien vaatimusten ja menettelytapojen mukaisesti.

3.2 Lyofilisoidun jauheen liuotus ja mallin lisääminen

Valmista Monkeypox Virus -lyofilisoitu esiseos näytteiden lukumäärän mukaan.Yksi näyte vaatii yhden PCR-putken, joka sisältää lyofilisoitua esiseosjauhetta.Negatiivinen kontrolli ja positiivinen kontrolli tulee käsitellä kahtena näytteenä.

(1) Lisää 15 µL liuottavaa liuosta jokaiseen PCR-putkeen, joka sisältää lyofilisoitua esiseosta, ja lisää sitten 5 µl uutettuja näytteitä/negatiivinen kontrolli/positiivinen kontrolli kuhunkin PCR-putkeen.

(2) Peitä PCR-putket tiukasti, pyyhkäise PCR-putkia käsin, kunnes lyofilisoitu jauhe on täysin liuennut ja sekoittunut, kerää neste PCR-putkien pohjalle välittömällä hitaalla sentrifugoinnilla.

(3) Jos käytät yleistä reaaliaikaista PCR-laitetta havaitsemiseen, siirrä PCR-putket suoraan amplifikaatioalueelle;jos käytät BTK-8:aa havaitsemiseen, sinun on suoritettava seuraavat toimenpiteet: siirrä 10 µl nestettä PCR-putkesta BTK-8:n reaktiosirun kuoppaan.Yksi PCR-putki vastaa yhtä sirulla olevaa kuoppaa.Varmista pipetoinnin aikana, että pipetti on 90 astetta pystysuorassa.Aerosolisulkupipetin kärjet tulee asettaa kuopan keskelle kohtuullisella voimalla ja lopettaa pipetin työntäminen, kun se saavuttaa ensimmäisen vaihteen (kuplien välttämiseksi).Kun kuopat on täytetty, poista reaktiosirukalvo peittämään kaikki kuopat ja siru siirretään sitten monistuksen havaitsemisalueelle.

4. PCR-monistus (tunnistusalue)

4.1 Aseta PCR-putket/reaktiosiru reaktiosäiliöön ja aseta kunkin reaktiokuopan nimet vastaavassa järjestyksessä.

4.2 Havaitsemisfluoresenssin asetukset: (1) Monkeypox virus (FAM);(2) Sisäinen valvonta (CY5).

4.3 Suorita seuraava pyöräilyprotokolla

Protokolla: ABI7500, Bio-Rad CFX96, SLAN-96S, QuantStudio:

Askeleet		Lämpötila	Aika	Pyörät
1	Esidenaturointi	95℃	2 minuuttia	1
2	Denaturaatio	95℃	10 s	45
2	Hehkutus, pidennys, fluoresenssin hankinta	60℃	30 s	45

BTK-8:n protokolla:

Askeleet		Lämpötila	Aika	Pyörät
1	Esidenaturointi	95℃	2 minuuttia	1
2	Denaturaatio	95℃	5 s	45
2	Hehkutus, pidennys, fluoresenssin hankinta	60℃	14 s	45

5. Tulosanalyysi (katso laitteen käyttöopas)

Reaktion jälkeen tulokset tallennetaan automaattisesti.Napsauta "Analysoi" analysoidaksesi, ja laite tulkitsee automaattisesti kunkin tulossarakkeen näytteen Ct-arvot.Negatiivisten ja positiivisten kontrollitulosten on oltava seuraavan kohdan "6. Laadunvalvonta" mukaisia.

6. Laadunvalvonta

6.1 Negatiivinen kontrolli: Ei Ct tai Ct>40 FAM-kanavalla, Ct≤40 CY5-kanavalla normaalilla vahvistuskäyrällä.

6.2 Positiivinen kontrolli: Ct≤35 FAM-kanavassa normaalilla vahvistuskäyrällä, Ct≤40 CY5-kanavalla normaalilla vahvistuskäyrällä.

6.3 Tulos on pätevä, jos kaikki yllä olevat kriteerit täyttyvät.Muussa tapauksessa tulos on virheellinen.

Tuloksen tulkinta

Seuraavat tulokset ovat mahdollisia:

	FAM-kanavan Ct-arvo	CY5-kanavan Ct-arvo	Tulkinta
1#	Ei Ct tai Ct>40	≤40	Monkeypox virus negatiivinen
2#	≤40	Kaikki tulokset	Monkeypox virus positiivinen
3#	40-45	≤40	Testaa uudelleen;jos se on edelleen 40-45, ilmoita numerolla 1#
4#	Ei Ct tai Ct>40	Ei Ct tai Ct>40	Virheellinen

HUOMAUTUS: Jos tulos on virheellinen, näyte on kerättävä ja testattava uudelleen.

tilaus Informaatio

tuotteen nimi	Kissa.Ei	Koko	Näyte	Säilyvyys	Trans.& Sto.Temp.
Monkeypox Virus Real Time PCR Kit	B001P-01	48 testiä/sarja	Seerumi/leesion erite	12 kuukautta	-25-15 ℃